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L-麦角硫因与艾地苯醌的相对抗氧化效力比较

Dec 22,2020 13:31 PM 上海 By 比莱


L-麦角硫因(EGT) 和艾地苯醌都是护肤品中出现的较新的抗氧化剂,L-麦角硫因(EGT)是一种稳定的抗氧化剂,存在于食用植物和经历较高水平氧化应激的动物组织中,也是菌菇中的主要抗氧化剂,雅诗兰黛旗下的Dr. Weils即主打这一成分。而艾地苯醌则是抗氧化剂辅酶Q的稳定类似物,美国品牌Dr. Perricone则是这一成分的忠实拥趸。



二者的抗氧化效果哪一个最好?

这篇文章通过测试对比了,辅酶Q10和EGT对脂质过氧化的抑制作用



EGT和艾地苯醌在单纯溶液中和在紫外线A(UVA)照射的细胞培养中清除过氧化物的能力。


以四氧嘧啶诱导脂质体脂质过氧化反应为指标,评价其对血管紧张素转换酶抑制剂的抑制作用,脂质过氧化物的形成; EGT和艾地苯醌对H2O2产生的羟自由基的直接清除能力。


UVA340辐射照射成纤维细胞,比较其清除自由基的抗氧化能力。


L-麦角硫因(EGT)是一种水溶性氨基酸,存在于玉米、燕麦和其他谷物中由于其特殊的硫酮(-S=H)基团,没有味道或气味,是高效、稳定的抗氧化剂。在氧化应激特别高的器官或细胞中,如红细胞、肝脏和肾脏,其含量最高,可达毫摩尔水平。


在等摩尔浓度下,EGT是比抗坏血酸(维生素C)、含硫抗氧化剂,包括N-乙酰半胱氨酸和谷胱甘肽等更好的脂质过氧化抑制剂。在一项基于臭氧的抗氧化活性评估中,EGT的活性高于硫辛酸、曲洛克斯、维生素C或曲洛克斯和维生素C的组合。


此外,EGT没有明显的降解或代谢,在尿液中以原型代谢,EGT的细胞受体和转运体是一种新型的有机阳离子转运蛋白-1(OCTN-1)。


麦角硫因及相关分子的结构



麦角硫因的两条需氧合成途径



EGT与左旋肉碱密切相关,是线粒体靶向的抗氧化剂,但由于跨膜渗透性弱,需与其受体结合OCTN-1才能跨膜转运。因此,由于EGT的是线粒体靶向,文章也比较了EGT和另一种线粒体靶向的抗氧化剂辅酶Q10(CoQ10)抑制脂质过氧化物形成的能力。


因为辅酶Q10不容易溶于水,所以在基于脂质的检测中对其进行了测试。这篇研究重点与艾地苯醌,即一种稳定的抗氧化剂辅酶Q10类似物比较,验证用于抗氧化剂的活性效力。




对比测试


1.脂质过氧化

用强脂质氧化剂四氧嘧啶作为氧化剂处理PC脂质体,EGT或辅酶Q10保护PC脂质体,测定脂质过氧化反应。用10 mM四氧嘧啶处理未受保护的PC脂质体,可使脂质过氧化水平增加389%。


EGT和辅酶Q10都能抑制脂质过氧化,但EGT在等摩尔浓度下比辅酶Q10更有效(图2)。经4.6μg/mL辅酶Q10处理的脂质体脂质过氧化程度降低了37%,而经4.6μg/mLEGT处理的脂质体的脂质过氧化程度降低了67%(图2)。




图1 

(A)培养的正常人真皮成纤维细胞(NHDF)中甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)和OCTN-1mRNA的扩增图谱。

                                                           (B)用抗OCTN1抗体(C-13)探针后,Western blot分析NHDF中的细胞总蛋白





图2

磷脂胆碱脂质体的脂质过氧化作用
用10 mM的四氧嘧啶和4.6g/mL至57.3mol g/mL的L-麦角硫氨酸或辅酶Q10处理



2.过氧化氢的直接清除

双氢罗丹明被过氧化物氧化形成荧光罗丹明。为了确定EGT或艾地苯酮对过氧化氢的直接清除作用,在培养基中加入双氢罗丹明、H2O2以及EGT或艾地苯酮,并测量120min的荧光强度。


EGT处理的样品在所有测试时间点的过氧化值均低于艾地苯醌处理的样品(P<0.05;图3),例如,在120min时,EGT样品的过氧化物含量比艾地苯醌样品低14%(P<0.05)。




图3

罗丹明123在细胞内的相对荧光强度

用1 mM H_2O_2和150μm的L-麦角硫醚或艾地苯酮(n=3,误差条为扫描电镜)处理培养基200后,用单因素方差分析确定统计学意义。



3.UVA340诱导的过氧化物的清除作用

研究者测试了EGT和艾地苯醌对模拟紫外线处理的成纤维细胞产生的过氧化物的抗氧化活性。
 
在100kJ/m2 UVA340作用下,EGT比艾地苯醌更迅速、更有效地清除ROS(P<0.001;图4)。与未经处理的照射细胞相比,经艾地苯醌处理的细胞的过氧化物水平无明显增加(P=0.5552)。

EGT作用在照射后即刻观察到ROS水平降低,而艾地苯醌对成纤维细胞ROS的降低作用要到照射后1h才能观察到。1h后,艾地苯醌可降低6.2%的ROS,EGT可降低17.5%的ROS。用150kJ/m2 UVA340照射也观察到类似的结果(数据未显示)。




图4

正常人皮肤成纤维细胞培养液中罗丹明123在UVA340灯下用100kJ/m2紫外线照射后的相对荧光强度。

用10μm的L-麦角硫醚或艾地苯酮处理细胞(n=6,扫描电镜误差条)。统计显著性采用单因素方差分析。



结果&讨论


EGT在抑制脂质过氧化形成方面比辅酶Q10或艾地苯醌更有效。在H2O2中加入抗氧化剂120分钟后,EGT处理的样品的过氧化氢含量明显低于艾地苯醌处理的样品。EGT在UVA340照射后捕获活性氧(ROS)的速度和效率明显提高。


EGT是一种天然的皮肤抗氧化剂,EGT是一种比辅酶Q10或艾地苯醌更强大的抗氧化剂,因为它在直接清除自由基和保护细胞免受紫外线诱导的ROS方面相对更有效。

在细胞中加入和调节抗氧化剂对于维持低水平的ROS是很重要的。高水平的RO会导致细胞损伤,如DNA损伤、细胞膜损伤和胶原降解,最终导致细胞死亡。

EGT是一种天然存在于人体许多组织和器官的抗氧化剂。转运蛋白由细胞在其表面显示,以捕获和保留细胞所必需的营养物质。这里展示了成纤维细胞转录OCTN-1基因并将其翻译成EGT转运蛋白。

综上所述,这些结果表明EGT在皮肤的抗氧化机制中起着天然的作用。此外,在三种抗氧化剂测量系统中的测试结果表明,EGT是一种非常有效的抗氧化剂:
1) 在防止脂质过氧化方面,它比辅酶Q10具有更强的抗氧化性
2) 直接清除过氧化物的能力优于艾地苯醌
3) 保护细胞免受紫外线诱导的ROS方面也优于艾地苯醌

由于这些抗氧化剂都与线粒体有关,表明EGT可能在一定程度上保护线粒体免受自动氧化的影响。EGT现在正被用于各种护肤产品,它提供了作为皮肤天然抗氧化系统的天然和非常有效的一部分的所有优势。






参考文献: 
A comparison of the relative antioxidant potency of L-ergothioneineand idebenone, Kelly K Dong et al, Journal of Cosmetic Dermatology, 6, 183–188,2007
 
Antiaging effects of a novel facial serum containing L-ascorbic acid, proteoglycans, and proteoglycan-stimulating tripeptide: ex vivo skin explant studies and in vivo clinical studies in women. Garre, A., et al, Clinical, Cosmetic and Investigational Dermatology, Volume 11, 253–263. 



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